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-86℃低温冰箱在冰冻切片上的应用

上海拓纷机械设备有限公司

2017/6/1 16:59:44

   随着超低温冰箱技术的不断发展,超低温冰箱在领域也逐渐被广泛应用。例如-86℃低温冰箱在冰冻切片上的应用,那就是冰冻切片环节中速冻,以减少冰晶形成。

    免疫组织化学染色中zui常用的一种切片方法,就是冰冻切片。它zui突出的优点,就是能够较完好地保存多种抗原的免疫活性,尤其是细胞表面抗原,更应采用冰冻切片。新鲜的组织及已固定的组织均可作冰冻切片。冰冻时,组织中水份易形成冰晶,往往影响抗原定位。一般认为冰晶少而大时,影响较小,冰晶小而多时,对组织结构损害较大,在含水量较多的组织中上述现象更易发生。冰晶的大小与其生长速率成正比,而与成核率(形成速率)成反比,即冰晶形成的数量愈多则愈小,对组织结构影响愈严重。因此,应尽量降低冰晶的数量。Fish认为冰冻开始时,冰晶成核率较慢,以后逐渐增加,其临界温度为-33℃,从-30℃降至-43℃之间,成核率急剧增加达1018,然后再减慢。基于上述理论可采取以下措施减少冰晶的形成。

(1)速冻,使组织温度骤降,缩短从-33℃到-43℃的时间,减少冰晶的形成。

其方法有二:

①干冰-丙酮(酒精)法:将150-200ml丙酮(酒精)装入小保温杯内,逐渐加入干冰,直至饱和呈粘稠状,再加干冰不再昌泡时,温度可达-70℃,用一小烧杯(50-100ml)内装异戊烷约50ml,再将烧杯缓慢置入干冰丙酮(纯酒精)饱和液内,至异戊烷温度达-70℃时即可使用。将组织(大小为1cm×0.8cm×0.5cm)投入异戊烷内速冻30-60s后取出,或置恒冷箱内以备切片,或置-86℃低温冰箱内贮存。

②液氮法:将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm),如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内,当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10-20s组织即迅速冰结成块。取出组织冰块立即置入-86℃低温冰箱贮存备用,或置入恒冷箱切片机冰冻切片。

-86℃低温冰箱参数:

产品系列

型号

容积L

温度℃

内尺寸:宽×深×高mm

外尺寸:宽×深×高mm

功率W

净重Kg

-86℃
立式

TF-86-30-LA

30

-25~-65

270x265x400

470x490x1120

200

60

TF-86-60-LA

60

-25~-65

364x405x409

540x620x1115

240

75

TF-86-80-LA

80

-40~-86

380×410×500

620×660×1275

450

80

TF-86-158-LA

158

-40~-86

380×415×1020

620×660×1795

500

100

TF-86-328-LA

328

-40~-86

500×500×1300

760×765×1975

550

170

TF-86-400-LA

400

-40~-86

500×600×1300

760×865×1975

650

190

TF-86-550-LA

550

-40~-86

600×700×1300

860×965×1975

800

220

TF-86-638-LA

638

-40~-86

700×700×1300

960×965×1975

1000

250

TF-86-750-LA

750

-40~-86

800×700×1300

1060×965×1975

1200

280

TF-86-938-LA

938

-40~-86

1000×700×1300

1260×965×1975

1700

320

-86℃
卧式

TF-86-50-WA

50

-40~-86

440×350×315

650×560×880

350

60

TF-86-105-WA

105

-40~-86

410×460×550

1140×760×930

400

105

TF-86-200-WA

200

-40~-86

710×510×560

1390×760×930

500

160

TF-86-300-WA

300

-40~-86

1010×510×580

1690×760×930

600

180

TF-86-480-WA

480

-40~-86

1300×600×600

1990×860×975

700

240

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