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副溶血性弧菌的测试片检测方法

方法编号：5044

1 适用范围：用于各类食品和原料中副溶血弧菌的检测，以及突发事件应急检测需要。

2 方法原理：采用一种商品化的一次性培养基产品，含有高选择性培养基、吸水凝胶和特异酶指示剂等重要成分，培养15～24小时就可确认是否有副溶血弧菌的存在。

3操作方法

3.1样品处理：取样品 25 mL（g）放入含有225 mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内，充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。

3．2接种：将测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5 min使培养基凝固，zui后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。

3．3 培 养： 将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。

3．4 结果判别:呈紫红色的菌落为副溶血弧菌。多数非目的菌在测试片上不生长，少数能生长，如创伤弧菌和霍乱弧菌，但菌落呈蓝色，明显区别于目的菌。对于出现阳性菌落的样品，用其他方法作进一步的鉴定。

4附加说明

4．1汕头出入境检验检疫局技术中心的对比试验结果表明，副溶血弧菌测试片具有较高的检测灵敏度和准确性，对纯菌的检测灵敏度达到8cfu/mL，与SN标准方法符合率达到90%以上。

4.2注意使用过的测试片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。

4．3出现阳性菌落的样本，用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的话至少再取样重复检验一次。