大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群测试片使用说明书

 1.适用范围：适用于各种水样中大肠埃希氏菌和耐热大肠菌群的快速检验

2.方法原理：耐热大肠菌群（thermotoletant coliform  bacteria）是总大肠菌群的一部分．将培养温度提高到44～45℃，在此条件下仍能生长和发酵乳糖的菌群被称为耐热大肠菌群。它们由埃希氏菌属以及克雷伯菌属、肠杆菌属和柠檬酸杆菌属中的一些菌种组成。其中大肠埃希氏菌（E.coli） 是zui准确和专一的粪便污染指示菌。与总大肠菌群相比，耐热大肠菌群在水体中的检出，说明水体更为不清洁，存在肠道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。大肠埃希氏菌耐热大肠菌群测试片运用酶底物技术，含有大肠埃希氏菌*葡萄糖醛酸酶（glucuronidase）的显色底物（XGLUC/blue），以及耐热大肠菌群半乳糖苷酶（galactosidase）的显色底物（SalmonGal/red）, 经过44.5℃培养后，大肠埃希氏菌显紫蓝色，红色或紫蓝色菌斑都属耐热大肠菌群。
3 操作方法

3.1对于大肠菌群检验显示阳性的纸片或产酸产气的发酵管，用接种环挑取菌液，转入2－3mL无菌水中混匀，用灭菌吸管吸取1mL慢慢均匀地滴加到大肠埃希氏菌耐热大肠菌群测试片上，然后放下上层膜，静置5 min使培养基凝固，zui后用手轻轻地压一下。

3.2将接种好的纸片平放于培养箱中，44.5℃培养15～24h观察结果。

4 结果判读: 测试片上出现红色或紫蓝色菌斑都是耐热大肠菌群阳性，其中紫蓝色为大肠埃希氏菌阳性。没有红色或紫蓝色斑点为阴性结果。

十、致病菌检测试剂盒使用说明

1适用范围：适用于生活饮用水、水源水及食品中致病性沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、致泻大肠埃希氏菌（含肠出血性大肠杆菌O157:H7）、腊样芽孢杆菌、板奇肠杆菌检测的检测以及大肠菌群污染程度的检测。

2方法原理：依据国标GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法，采用包被技术将相对应培养基包被在试剂盒底部，随时取用。

3样品稀释：同国标法。液体样品取原液。固体或半固体样品用灭菌生理盐水配制成1:10和1:100的稀释液。

4 致病菌检测

4.1加样：用灭菌吸管吸取原液或1:10样品稀释液4ml～10 ml（不得少于4ml）分别加入到标号为1、2、3、A、B、C的增菌格（孔）内。加样后的1、2、3号分别为副溶血弧菌、致泻大肠埃希菌、板奇肠杆菌增菌液；A、B、C分别为金黄色葡萄球菌、沙门菌、腊样芽孢杆菌增菌液。

4.2培养：将加样后的试剂盒盖上盖，平放在36℃±1℃培养箱内培养18小时。

4.3 观察结果：如果某致病菌的增菌液发生浑浊，即预示含有此种致病菌。可按国标法进一步检测。也可取阳性菌液1mL，加入到含有9 mL灭菌生理盐的试管内，混匀，取1mL，接种到相对应的测试片上，36℃±1℃培养18小时加以验证。

5大肠菌检测

5.1加样：将试剂盒放在试验台面上，打开盒盖，用灭菌吸管分别吸取3个原液或1:10样品稀释液1ml加到标号为4、5、6的小培养基孔内。另用灭菌吸管分别吸取3个1:10或1:100的样品稀释液1ml加到标号为7、8、9的小培养基孔内，标号为10的小培养基孔内可加入1ml灭菌生理盐水作为培养基阴性对照孔使用。

5.2排气泡：加样后集气窗内如有气泡存在，可将试剂盒以30～45度角倾斜使气泡排出，必要时可轻轻用力在桌面上敲击数下排出气泡。

5.3培养：将加样后的试剂盒盖上盖，平放在36℃±1℃培养箱内培养18～24小时。

5.4观察结果：样液变为黄色为产酸、集气窗中有气泡为产气，产酸产气者为阳性结果，阳性结果的孔数越多，说明污染越严重。

6 注意事项

6.1致病菌检测与大肠菌检测可同时进行；加入样品后不需摇匀；大肠菌检测培养前一定要排气泡，排气泡的方法与结果观察可参见大肠菌试剂盒使用说明中的图像显示；在培养箱中取试剂盒时注意平托出来，避免由于试剂盒的倾斜使大肠菌阳性集气窗中的气泡流失而影响结果判断。

6.2试剂盒为一次性无菌包装用品，供一次性即开即用，。

7 保存条件和有效期：避光保存于阴凉干燥处，*温度为2～8℃，有效期18个月。