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金黄色葡萄球菌的测试片检验方法

方法编号：5042 

1 适用范围：可用于各类食品和原料中金黄色葡萄球菌的检测以及突发事件应急需要。

2 方法原理：将选择性培养基中加入专一性的酶显色剂，并将其加载在纸片上，通过培养，如果样品中含有黄色葡萄球菌，即可在纸片上呈现紫红色的菌落。

3 操作方法

3．1 样品处理：无菌操作取25g（25mL）样品放入含有225mL无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，充分振摇或置均质器中制成样品匀液，静置片刻。

3．2接种：将测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置5 min使培养基凝固，zui后用手轻轻地压一下。每个样品接种两片。

3．3培养：将加了样的测试片叠放在一起，放入原来的自封袋中，堆叠片数不超过12片，透明膜向上平放在37℃培养箱内培养15h～24h。

3．4 结果观察：对测试片进行观察，紫红色菌落为金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌，普通大肠杆菌呈蓝色菌落，而溶血性链球菌，沙门氏菌，变形杆菌在试片上不生长。

4 附加说明

4．1山东省疾病预防控制中心的验证结果表明，当金黄色葡萄球菌在0～9个菌落范围内时，测试片与血平板均能检出，作为致病菌不得捡出的标准要求，可以作为金黄色葡萄球菌检验应用。

4．2 本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测，用取样棉签涂抹被测物体表面，放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中，摇晃10s，然后取1mL接种到测试片上。

4．3试验后纸片应及时按生物安全要求进行无害化处理。

4．4出现阳性菌落的样本，用其他更为可靠的方法进行验证，没有条件的话至少再取样重复检验一次。