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货号：70022 mRNA纯化试剂盒 (12)
英文名称：Oligotex mRNA Mini Kit (12)
中文名称：mRNA纯化试剂盒 (12)
品 牌：Qiagen
货 号：70022
从总RNA中纯化mRNA以及回收体外转录产物
只需30分钟即可获得高产量纯MRNA
无需使用Oligo-DT纤维素或乙醇沉淀
灵活性强，适合不同起始量的RNA样品
Oligotex mRNA Kits可从总RNA中纯化mRNA，回收poly A+体外转录子。每个Oligotex Kit包括用于结合poly A+ mRNA的Oligotex树脂和用于洗涤、洗脱结合的mRNA的离心柱。Oligotex Direct mRNA Kits可从细胞和组织中纯化mRNA。 70022 mRNA纯化试剂盒特点 | 参数 |
应用 | PCR, real-time PCR, microarray, transfection.. |
洗脱体积 | 20–100 µl |
规格 | Spin column |
主要样本类型 | Total RNA |
处理 | Manual (centrifugation) |
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | Poly A+ mRNA |
样本量 | <250 µg |
稳定 | Yes |
技术 | Polystyrene-latex particles |
每次运行或制备时间 | 33–50 minutes |
产量 | >90% recovery |
性能
Oligotex mRNA kits适用于从少于0.25 mg到1 mg总RNA起始材料中分离mRNA（见表）。
使用Oligotex树脂纯化的Poly A+ mRNA适用于RT-PCR（参见RT-PCR of beta-actin mRNA），使用Oligotex树脂从总RNA中纯化的poly A+ mRNA已被用于Northern 印记、点印记或狭缝印记（参见Isolation of mRNA from total RNA）。
表. Oligotex mRNA kits的规格每次实验起始材料量（总RNA） | 每个Oligotex mRNA Mini Kit*zui多制备次数 | 每个Oligotex mRNA Midi Kit*zui多制备次数 |
≤0.25 mg | 12 (13)† | 12 (28)† |
0.25—0.5 mg | 6 | 12 (14)† |
0.5—0.75 mg | 4 | 12 (14)† |
0.75—1 mg | 3 | 12 |
* 使用离心管操作流程。批量实验流程可选。
† 购买额外的离心柱后，每个试剂盒的zui多制备次数。可能需要额外的1.5 ml微离心管。
原理
Oligotex mRNA Kits含有离心柱和各种必需的试剂，用于从总RNA样品中纯化poly A+ mRNA或回收体外转录产物。Oligotex树脂由大小均一（直径1.1 µm ）的聚苯乙烯-橡胶颗粒组成，为*的球状（参见Oligotex particles and oligo-dT cellulose），含有与表面共价结合的dC10T30寡核苷酸。Oligotex颗粒的大小、成分和表面结构经优化，均匀分散并需要zui少的离心时间。颗粒形成稳定的悬浮液，为快速和高效结合多聚腺苷酸提供较大的表面积。
高效率、高精确度的杂交确保通过快速、高效的杂交获得高纯度的poly A+ mRNA。mRNA回收率通常都高于90%。Oligotex纯化过程将poly A+ RNA流失降至zui低，避免RNase降解风险，手动操作时间zui少化。这些都使得该产品是同步处理多个样品的理想选择。Poly A+ mRNA适用于各种标准应用，也适用于敏感应用，如表达分析、差异显示、cDNA文库构建、显微注射和SAGE技术。Oligotex Suspension也可单独购买。
操作流程
经优化的Oligotex纯化流程方便简单（参见Oligotex mRNA procedure），将总RNA与Oligotex树脂共同孵育，简单离心收集Oligotex:mRNA复合物。试剂盒中提供的离心柱提供zui方便的操作，同时为某些应用提供可选的批量操作流程。洗涤之后，用小体积量的Tris缓冲夜或水洗脱mRNA。无需乙醇沉淀。
应用
使用Oligotex树脂纯化的Poly A+ mRNA适用于多种下游应用，包括：
消减杂交
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