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货号:74004 痕量样品总RNA提取试剂盒 (50)
英文名称:RNeasy Micro Kit (50)
中文名称:痕量样品总RNA提取试剂盒 (50)
品 牌:Qiagen
货 号:74004
74004 痕量样品总RNA提取试剂盒 从细胞或组织样本中纯化至多45 μg的总RNA
数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
即用型RNA在各种下游应用中表现良好
微量起始样本, RNA产量稳定
无需酚/抽提
无需CsCl梯度离心,无需LiCl或乙醇沉淀
RNeasy Micro Kit于从微量细胞和组织样本中纯化至多45 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系高效破碎样本。可在QIAcube全自动核酸分析仪上应用RNeasy Micro Kit实现RNA纯化全自动化。处理更大的样本,可使用RNeasy Mini Kit(离心柱结合能力为100 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(离心柱结合能力为1 mg RNA)或RNeasy Maxi Kit(离心柱结合能力为6 mg)。 特点 | 参数 |
应用 | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
洗脱体积 | 10–14 µl |
规格 | Spin column |
主要样本类型 | Tissue, cells |
处理 | Manual |
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | RNA |
样本量 | <5 mg |
技术 | Silica technology |
每次运行或制备时间 | 30–40 minutes |
产量 | Varies |
性能
RNeasy Micro Kit可从微量样本中得到高产量总RNA,且重复性好。从少量细胞,包括单细胞以及微量标准组织样本中都能纯化得到总RNA(参见Reliable RNA isolation from a single cell、Highly reproducible yields for sensitive applications和High-quality total RNA from fine needle aspirates)。RNeasy Micro Kit通过高效的柱上基因组DNA消化可使珍贵的样本在定量基因表达分析中得到zui大的敏感度,如real-time RT-PCR(参见Efficient on-column removal of genomic DNA)。
原理
RNeasy Micro Kit于从微量样本中纯化总RNA,如显微切割组织、细针穿刺样本、微量纤维组织包括心脏和肌肉组织、微量细胞、甚至是单细胞(如FACS筛选细胞)。处理显微切割FFPE组织,我们*使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技术整合了*/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA的纯化技术。RNeasy MinElute离心柱*的设计可确保zui小的洗脱体积,小至10 µl,实现RNA的高度浓缩。小洗脱体积意味着下游的反应可控制在小体积范围内,提高反应效率。高纯度确保全部样本可用于反转录等下游应用,无酶抑制。
操作流程
RNeasy Micro Kit于从微量样本中纯化总RNA。先对样本(<5 mg组织或<5 x 105个细胞)进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy MinElute离心柱,RNA(至多45 µg)结合到硅胶膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase,确保简单、高效的柱上基因组DNA消化,适用于敏感的应用。DNase和其他污染物被高效洗去后,10–14 µl水洗脱得到高浓度的纯化RNA。
应用
RNeasy Micro Kit纯化得到小洗脱体积(10 µl)RNA,重复性好,适用于敏感的定量基因表达分析,包括以单细胞为起始样本的real-time RT-PCR。