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HBLG-6型水样过滤器

济南海博LG-6型水样过滤器单价为5000元

GL-6型铜绿假单胞菌检测 （滤膜法）水样过滤装置为本公司自主产品，整体采用食品级不锈钢制作，六联式，做5个水样批次时其中一联可关闭（每联都配有开关阀门）根据国标GB8538-2016要求，滤床可高温灭菌，根据经验，我们配置的是循环水式抽水装置，负压可达-0.098Mpa，真空度好，并配有2500ml水样缓冲瓶，6个水样一次完成，水样过滤装置整体做工考究，坚固耐用，也可用于其他无菌检测过滤用，性价比好。

GB8538-2016 铜绿假单胞菌检测操作步骤（部分）

水样过滤在100级的洁净工作台进行过滤操作。首先用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将250mL水样或稀释液通过孔径0.45μm 的滤膜过滤,然后将过滤后的滤膜贴在已制备好的CN 琼脂平板上,平铺并避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡。

培养将平板倒置于36℃±1℃培养24h~48h,并防止干燥。

结果观察

在培养20h~24h和40h~48h后观察滤膜上菌落的生长情况并计数。

计数所有显蓝色或绿色(绿脓色素)疑似铜绿假单胞菌的菌落,并进行绿脓菌素确证性试验。

在紫外线下检查滤膜时,应避免长时间在紫外光下照射,否则可能会将平板上的菌落杀灭,而导致无法在证实培养基上生长。计数滤膜上所有发荧光不产绿脓色素疑似铜绿假单胞菌菌落,并进行乙酰胺肉汤确证性试验。

将其他所有红褐色不发荧光的菌落进行氧化酶测试、乙酰胺液体培养基、金氏B培养基确证性试验,培养20h~24h观察结果,防止因为培养40h~48h导致菌落过分生长而出现菌落融合。

最终的铜绿假单胞菌菌落计数应按GB8538-2016国家标准中57.6中式(128)进行计算。

在CN 琼脂上生长的菌择和验证步骤见GB8538-2016国家标准中表31。

检测中所需培养箱、培养基、100级洁净工作台，356nm紫外检查灯及各种常规实验器具本公司均有售。

本产品也可用于GB8538-2016国标中第55项大肠菌群检测中的第二法（滤膜法）的水样过滤以下是GB8538-2016国家标准中55项大肠菌群检测中的第二法（滤膜法）的部分检测步骤

用灭菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将100mL水样(如水样含菌数

较多,可减少过滤水样量,或将水样稀释)注入滤器中,打开滤器阀门,在-5.07×104 Pa(负0.5大气压)下抽滤。

水样滤完后,再抽气约5s,关上滤器阀门,取下滤器,用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分,移放在品红亚硫酸钠培养基上,滤膜

截留细菌面向上,滤膜应与培养基贴紧,两者间不得留有气泡,然后将平皿倒置,放入36℃±1℃恒温箱内培养24h

±2h。

观察滤膜上面的菌落特征。大肠菌群典型菌落在远藤培养基上具有以下特征:

a) 紫红色,具有金属光泽的菌落;

b) 深红色,不带或略带金属光泽的菌落;

c) 淡红色,中心色较深的菌落;

d) 挑取不少于3个(不足3个则全挑)可疑菌落,进行革兰氏染色镜检观察。

凡系革兰氏阴性无芽孢杆菌,再接种乳糖蛋白胨培养液,经36℃±1℃培养24h±2h后,如产酸产气则判定为大肠菌群阳性。

结果与报告

滤膜上的大肠菌群菌落数按式(127)计算,以每100mL水样中的大肠菌群数报告结果:

每100mL水中大肠菌群菌落数(CFU/100mL)=确证为大肠菌群菌落数(CFU)×100 过滤的试样量(mL) 

国标GB8538-2016 部分

操作步骤推测性检验

①水样过滤

应根据水质污染情况确定水样的稀释倍数,以滤过一张无菌滤膜后能产生20个~100个菌落为宜,每张滤膜过滤250

mL水样或稀释液在100级的洁净工作台进行过滤操作。首先用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,滤膜经过滤后应直接转移到KF链球菌琼脂培养基上,同时避免在滤膜和培养基之间夹留着气泡。

②培养:

将培养皿倒置,在36℃±1℃培养48h。

③计数:

粪链球菌菌落在滤膜上呈现大小不等的红色或粉红色菌落。挑取不少于5个(不足5个则全挑)可疑菌落,进行革兰氏染色。镜检观察,粪链球菌应为革兰氏染色阳性球菌,常排列成短链状。根据菌落特征符合情况计数每250mL水样中的典型菌落数。

④确证性试验：

从滤膜上挑取典型的菌落,接种到脑-心浸萃琼脂培养基斜面上,在36 ℃±1 ℃培养24h~48h。如果有菌落生长,则继续按56.5.2.2和56.5.2.3的步骤进行。

56.5.2.2 用接种环从脑-心浸萃琼脂培养基斜面上挑取典型培养物到一片清洁的载玻片上,加几滴新鲜配制的3%过氧化氢到载玻片的涂抹菌苔上,如果没有气泡发生,则显示过氧化氢酶反应为阴性,则菌落可视为可疑粪链球菌,需继续如下的确信过程。

如果有气泡发生,则过氧化氢酶反应为阳性,因此菌落不属于粪链球菌,确信试验到此即可停止。用接种环从脑-心浸萃琼脂培养基上转移一环培养物到脑-心浸萃液态培养基内,在45 ℃培养48h。

此外,也同时转移一环培养物到胆汁液态培养基中,在36℃±1℃培养3d。胆汁液态培养基由40mL无菌的100g/L牛胆盐溶液加入60mL无菌的脑-心浸萃液态培养基中配制而成。转移到上述培养基后,若能够生长繁殖,则结果表示为阳性,证实为粪链球菌。

结果与报告

根据上述典型菌落的计数(56.5.1.3)和确证性试验为阳性的结果(56.5.2),计算每250mL水样中的粪链球菌数量,结果以CFU/250mL计。