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AKTA蛋白纯化系统的程序设定操作

时间:2024-09-26      阅读:162

AKTA蛋白纯化系统的程序设定操作在method editor窗口点击工具栏内的method wizard,弹出窗口界面如Fig 11所示,可以分别在main selection、column以及column position三个下拉菜单中选择所要用到的层析方法、所用到的层析柱的参数以及所安装的层析柱在柱位选择阀的位置,选好之后,点击next按钮进入下一步波长和溶液进口的设定(Fig 12),在此可以设定检测的波长,针对AKTA EXPLORER可以一次选择三个波长共同进行监控,并在此设定A泵和B泵的溶液进口,设定好之后,点击next,出现如Fig 13所示窗口,可以在此设定对层析柱进行平衡的条件。
 
 
                                                      Fig 11                                                                                                Fig 12

                                                        Fig 13                                                                                    Fig 14
完成之后,点击next出现Fig 14的窗口,在此可以设定上样的条件,可选择的条件包括上样的方式,如上样环上样以及样品泵上样,对上样的体积也要进行设定。如果利用系统泵上样,在此无法进行设置,不过可以利用A泵和B泵的两个进口在后面的步骤中进行设置。
在上步设置完成之后,点击NEXT出现如Fig 15所示窗口,这里是针对流穿组分收集所进行一些设置,针对安装的不同的收集器,具体内容可能有些差异,这里显示的界面是在安装了Frac-950收集器之后所出现的界面,设置完成点击NEXT出现如Fig 16所示的窗口,设置目标组分收集的一些参数,点击NEXT,出现如Fig 17所示的窗口,针对具体的洗脱条件可以进行设置。
当全部设置完成之后,点击finish,弹出Fig 18所示的窗口,可以再一次对所进行的设置进行进一步的修改,完成之后点击按钮,完成程序存盘操作。至此完成洗脱程序的设定工作,在应用自动洗脱程序时,可在SYSTEM CONTROL窗口点击文件菜单栏中的FILE→Run,在弹出的对话框中选择目标洗脱程序所在的位置并执行,之后会依次弹出一些对话框,主要是再次确认程序的设置条件,并选择洗脱结果文件的保存位置,全部设置完之后,洗脱将自动进行,结果将自动的保存在设定的文件夹中。

                                                  Fig 15                                                                                         Fig 16

                                                    Fig 17                                                                                          Fig 18

结果的浏览与简单处理
在纯化完成后,Unicorn软件会自动的按照预先的设置保存结果文件,如果没有,那么结果文件会保存于一个文件名以manual N开头的文件中,N为系统依次生成的一个1-10之间的数字。
对于结果的浏览应在evaluation窗口(Fig 19)中进行,打开文件及对文件进行普通编辑的菜单如Fig 20所示。
 Fig 19 Evaluation窗口 
Fig 20 纯化结果普通编辑菜单

这里已经选择了一个纯化文件,打开后,在结果浏览窗口点击鼠标右键,选择properties,可以弹出如Fig 21所示的操作菜单,可以分别对结果进行编辑,如改变曲线的颜色,设定横轴或纵轴的显示区间,进行文本文件的编辑等等。

                                                                                         Fig 21

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