DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)使用说明书

【产品组成】

【保存条件】

 -20℃,避光,6个月

【产品概述】

  DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是适用于常见细胞和组织细胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidinedihy drochloride，也称DAPIdihydrochloride，分子式为C16H15N5•2HCl，分子量为350.25，是可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，灵敏度高于EB。

  DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。DAPI的大激发波长为340nm，大发射波长为488nm，DAPI和双链DNA结合后，大激发波长为364nm，大发射波长为454nm。DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，亦可以根据实验具体要求，秲释到相应浓度后进行染色，无需单独封片步骤。一般*工作浓度为0.5～10μg/ml。

【使用方法】

1、对于细胞或组织样品，固定后冲洗去除固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，则*行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行DAPI染色，如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的DAPI染色。对于贴壁细胞或组织切片，加入少量DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积以上的DAPI染色液，充分混匀。

2、室温放置5～8min。

3、轻轻吸除DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)。

4、用无菌的PBS或生理盐水清洗2～3次，每次3～5min。

5、无需封片，直接在荧光显微镜下观察。

【染色结果】

细胞収生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。

【注意事项】

1、DAPI染色液(5ug/ml,含封片剂)的浓度适用于绝大多数常觃染色的需要。

2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

3、避免反复冻融，否则容易失效。

4、DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。