BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒使用说明书
时间：2019-04-10 阅读：871
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南京森贝伽生物科技有限公司 -
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BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒使用说明书
【产品组成】
Component | SBJ-1049S | Store at |
试剂(A): Alkaline Phosphatase Color Buffer | 50ml | 4℃ |
试剂(B): BCIP solution(300×) | 175μl | 4℃,避光 |
试剂(C): NBT solution(150×) | 350μl | 4℃,避光 |
【保存条件】
4℃,避光,12个月。
【产品概述】
BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物，在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
【使用方法】
1、对于组织切片或细胞样品或膜，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。
3、按照如下比例依次加入各溶液，混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液：
名称 | 规格 | 规格 |
Alkaline Phosphatase Color Buffer | 3ml | 10ml |
BCIP solution(300×) | 10μl | 33μl |
NBT solution(150×) | 20μl | 66μl |
BCIP/NBT染色工作液 | 3.03ml | 11ml |
4、洗涤完毕后，去除洗涤液。
5、加入适量BCIP/NBT染色工作液，确保能充分覆盖样品。
5、室温避光孵育5～30min或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。
6、去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸馏水洗涤1～2次即可终止显色反应。
7、对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutral red staining solution)染色，以便于观察。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。
【注意事项】
1、BCIP对人体有刺激性，NBT对人体有害，请注意适当防护。
2、操作过程中，尽量避免强光照射。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。