液相色谱-超高分辨质谱助力重组AAV的序列覆盖度和 分子量分析
时间:2023-07-13 阅读:315
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315次重组腺病毒(rAAV)是一种广泛使用的基因治疗载体,目前共13种血清类型被鉴定。AAV衣壳由60个拷贝的三种蛋白亚基组成,分别是VP1(大约80 kDa)、VP2(大约70 kDa)和VP3(大约60 kDa)[1]。其中,VP2包含VP3的全部序列,VP1包含VP2的全部序列[2]。理论上VP1:VP2:VP3的质量比例为1:1:10。由于三种亚基的序列相似但相对丰度相差较大,三种亚基在常规分离中容易共洗脱,导致VP1和VP2的信号无法正常解析。在实际检测的过程中,有些AAV样品中VP1的含量极少,与VP3的比例甚至低于1:1000,导致VP1信号难以检测。