非洲猪瘟检测设备及仪器使用说明
时间：2019-05-20 阅读：1085
非洲猪瘟检测设备及仪器使用说明
非洲猪瘟从2018年年底至今一直是大家关注的热点，许多大型的屠宰产，和当地的政府机构，都将及时发现非洲猪瘟，及时检测出非洲猪瘟，及时将非洲猪瘟疫情控制住，减少人民和企业的损失作为重点工作，本公司提供非洲猪瘟检测的相关设备并且提供配套的试剂盒和相关的检测说明，下面就设备清单和试剂盒检测说明为大家呈现，欢迎随时跟公司业务经理洽谈业务。
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非洲猪瘟检测设备及仪器使用说明操作步骤
样品处理
血液样品直接用；淋巴结、脾脏、扁桃体样品，用无菌的剪刀和镊子剪取待检样品2.0 g于研钵中充分研磨，再加10.0 mL PBS（pH 7.2，含1万单位*和1万单位*）混匀（样品不足2.0 g按1:5比例加PBS），对处理的待检样品置70℃，30 min灭活后，3 000 r/min，4 ℃离心5 min，取上清液，编号备用；血球粉处理同上，只不过省掉研磨步骤。
1.2 样品存放
采集或处理好的样品在2℃～8℃条件下保存应不超过24 h；若需长期保存，须放置-80 ℃冰箱，但应避免反复冻融（冻融不超过3次）。
1.3 操作步骤
1.3.1 病毒DNA的提取（使用A盒）
（1）待检样品、阳性对照和阴性对照的份数总和用n表示，取n个灭菌的1.5 mL离心管，逐管编号。
（2）每管加入Buffer A 500 mL。
（3）每管分别加入已处理的待检样品、阳性对照、阴性对照各200 mL，充分混匀，室温放置10分钟。
（4）取与上述离心管等量的DNase-Free吸附柱和收集管，编号。将离心管中的溶液转移至DNase-Free吸附柱，（为避免堵塞吸附柱，尽量不要吸悬浮杂质）。
（5）13000 r/min室温离心30 sec。
（6）弃去收集管液体，将吸附柱放回收集管中。
（7）吸附柱内加入600 μL Buffer B，13000 r/min离心30 sec。
（8）弃去收集管液体，将吸附柱放回收集管中。
（9）重复步骤（7），（8）。
（10）13000 r/min空柱离心2 min，去除残留液。
将每个吸附柱分别移入新的1.5mL离心管中，向柱*加入50 μL Buffer C，室温静置1 min，13000 r/min离心30 sec，离心管中液体即为模板DNA。获得的DNA溶液，冰上保存备用（注意提取的DNA须在2 h内进行PCR 扩增，若需长期保存须放置-80 ℃冰箱，但应避免反复冻融）。