菌落总数的快速测定方法 适用范围：可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。
菌落总数的快速测定方法
1 适用范围 ： 可用于各类食品及原料中菌落总数的测定 。 也可用于与食品接触的容器 、 操作台和其他设备表
面的卫生检测。
2 方法原理：将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑（ TTC ）显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，
细菌菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。
3 操作方法
3.1 样品处理 ： 无菌称取样品 25g （ 或 25mL ） 放入含有 225mL 无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内 ， 经充分
振摇 （ 均质 ） 做成 1:10 的稀释液 。 用 1mL 灭菌吸管吸取 1:10 稀释液 1mL ， 注入含有 9mL 灭菌生理盐水的试
管内 ， 用 1mL 灭菌吸管反复吸吹制成 1:100 的稀释液 。 以此类推 ， 做出 1:1000 等稀释度的稀释液 ， 每个稀释
度更换一支灭菌吸管。
3.2 接种：一般食品选 2 ～ 3 个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用
原液检测 。 将测试片放在水平台面上 ， 揭开上面的透明薄膜 ， 用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液 1mL ， 均匀
加到中央的纸片上，轻轻将上盖膜放下，静置 5 min 使培养基凝固，zui后用手轻轻地压一下。每个稀释度接
种两片。
3.3 培养 ： 将测试片叠在一起放回原自封袋中 ， 透明面朝上水平置于恒温培养箱内 ， 堆叠片数不超过 12 片 。
培养温度为 36 ℃± 1 ℃ ，培养 15 ～ 24h 。
4 结果判断与计数：
4.1 细菌在纸片上生长后会显示红色斑点 ， 选择菌落数适中 （ 10 个～ 100 个 ） 的纸片进行计数 ， 乘以稀释倍
数后即为每克（或毫升）样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在 100 以内时，按实有数报告。大于 100 时 ，
用二位有效数字，二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，并以 10 的指数来表示。
4.2 计数原则与报告方式
4.2.1 通常选择菌落在 10 个～ 100 个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见下表中例次 1 ） 。国家
标准菌落总数报告方式术语为 cfu/g 或 mL ， cfu 的含义为菌落形成单位。
4.2.2 若有两个稀释度的菌落数在 10 个～ 100 个之内，两者的比值小于 2 ，则取其平均数，若大于 2 ，则采
用稀释度小者报告。
4.2.3 若三个稀释度的菌落数都有在 10 个～ 100 个之内时，应选择二个低数值的平均数。
4.2.4 若三个稀释度的菌落数均小于 10 个或大于 100 个时 ， 应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数 ；
或采用均小于数量标准的zui小值，或采用均大于数量标准的zui大值。
5 表面取样方法 ： 加 1mL 灭菌生理盐水在测试片上 ， 静置至少 1h 使培养基凝固 ； 提起上层膜 ， 使中央滤纸
部分贴到待测物表面，用手在外侧轻压；然后将上盖膜合上，置培养箱内培养。
6 注意事项：使用过的纸片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。
：李菲     :