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晶体、未消毒(G418 硫酸盐)
稳定性: 非常稳定,可以粉末形式在室温下 (15°C 至 30°C) 保存zui多 3 年;可溶于水。
Invitrogen 11811031 Geneticin® Selective Anti
Validated Application: | Eukaryotic Selection⁄Stable Cell Line Generation |
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Agent: | Geneticin® (G-418) |
Form: | Powder |
Reagent Type: | Antibiotic (Selective) |
Product Size: | 5 g |
Shipping Condition: | Room Temperature |
Invitrogen 11811031 Geneticin® Selective Anti
G418(G-418即G-418 sulfate,也称Geneticin,分子式为C20H40N4O10.2H2SO4,分子量为692.71 g/mole)是一种氨基糖类抗生素,其结构与*、*、*相似,它通过影响80S核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性 ,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。是稳定转染zui常用的选择试剂。当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
G418和筛选
筛选之前由于每种细胞对G418的敏感性不同,而且不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性不尽相同,所以在筛选之前,一定要确定G418的zuijia筛选浓度。具体如下:将细胞稀释到1000个细胞/mL,在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选,选择出在10~14天内使细胞全部死亡的zui低G418浓度来进行下一步的筛选试验。
由于每种细胞对G418的敏感性不同,一般变动在100ug/ml~1000ug/ml范围。而且不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性不尽相同,所以在筛选之前,一定要确定你的细胞对这一批G418的筛选浓度。尽管如此,特性明确的细胞系G418的zuijia用量还是稳定的。《分子克隆》给出了几个常用细胞系所需G418的zuijia用量 :
细胞系或机体 | G418浓度(ug/ml) |
中国仓鼠卵巢细胞 | 700~800 |
Madin-Darby犬肾细胞 | 500 |
人上皮A431细胞 | 400 |
猿CV-1细胞 | 500 |
盘基网柄菌属 | 10~35 |
植物 | 10 |
酵母 | 125~500 |