正相色谱柱的清洗与再生
时间:2013-08-20 阅读:2209
通常正相色谱柱的清洗与再生方法与反相色谱柱用极性逐渐减弱的溶剂系统冲洗相反,其用极性
逐渐增强的溶剂系统冲洗¨。根据Themo公司研究,硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱按以下方法冲洗:
3一甲基戊烷或己烷一三氯乙烷一乙酸乙脂一丙酮一乙醇一水,然后以这些溶剂逆序冲洗,zui后以流动 相平衡.该方法从非极性溶剂缓慢过渡性溶剂水,然后逆序冲洗至非极性溶剂,对色谱柱损伤小,且具有良好的再生效果.然而该方法耗时长,消耗溶剂多,在很多时候应用较少,因此在具体应用过程中可省略其中一种或几种溶剂.Agilent公司使用的方法更简洁,用甲醇:氯仿(50:50, )一乙酸乙酯反冲色谱柱,然后再按正方向用流动相平衡.常规硅胶或硅胶基质正相色谱柱,也可依次以四氢呋喃、甲醇、四氢呋喃、二氯甲烷和无苯正己烷冲洗40~ 60倍柱体积¨ ,或用5% ~95% 乙腈水溶液的60min梯度清洗,然后用30 mL含2.5%二甲氧基丙烷和2.5% 冰醋酸的正己烷溶液冲洗色谱柱,除去硅胶上吸附的水(艾杰尔公司).对强惰性的石墨化碳和有机聚合物正相柱,可以使用一些强酸或强碱清洗.Shodex及Themo公司用的稀酸和稀碱结合清洗法,可将有机聚合物正相柱上大部分污染物洗脱:5 mL水一60 mL的0.1tool/L HC10 水溶液一5 mL水— 0 mL的0.1 mol/LNaOH水溶液一5 mL H,O在0.5 mL/min流速下反向冲洗.使用0.1 mol/L盐酸与有机溶剂结合清洗石墨化碳柱,也具有良好的再生效果:二氯甲烷、甲醇、水、0.1 mol/L盐酸、水、甲醇、二氯甲烷,zui后用0流动相冲冼至平衡.
对于是不同的色谱柱冲洗方法都不一样,所以在再生操作前,一定要查到相关的专著再进行。