荧光显微镜结构和主要部件-高压汞灯作为光源
时间:2024-09-14 阅读:124
荧光显微镜
从光源的作用上来看,普通光学显微镜是利用可见光使镜下标本得
到照明,通过放大系统进行观察,因此,看到的是样品的本色,光源起
到照明作用;而荧光显微镜(fluorescence microscope)则是利用一定
波长的光激发样品,使其产生荧光,通过放大系统放大后,看到的不是
样品的本色,而是其荧光.所以光源起到的是激发作用,而非照明。由
此看出.荧光显微镜的主要特点在于其光源。按激发光照射的方式.有
透射和落射2种。荧光显微镜的结构和主要部件包括以下几部分。
(1)光源。荧光显微镜一般采用200W的超高压汞灯作为光源.由石
英玻璃制作,超高压汞灯发射很强的紫外和蓝紫光,足以激发各类荧光
物质。另外超高压汞灯工作时散发出大量热能,因此,灯室必须有良好
的散热条件。
(2)滤色系统。滤色系统是荧光显微镜的重要部件,由激发滤板和
压制滤板组成。根据光源和荧光色素的特点.激发滤板分为3类:紫外
光激发滤板、蓝光激发滤板和紫蓝光激发滤板,分别可以提供一定波长
范围的激发光。压制滤板的作用是阻挡激发光通过,提供相应波长
范围的荧光,与激发滤板相对应,有3种压制滤板:紫外光压制滤板、
蓝光压制滤板和紫蓝光压制滤板。
(3)反光镜。反光镜的反光层一般是镀铝的,因为铝对紫外光和可
见光的蓝紫区吸收少,反射达90%以上(银的反射只有70%)。一般使用
平面反光镜。
(4)聚光镜。专为荧光显微镜设计制作的聚光镜是用石英玻璃或其
他透紫外光的玻璃制成,分明视野聚光镜和暗视野聚光镜2种。
(5)物镜。各种物镜均可应用.但用消色差的物镜,因其自体
荧光极微,且透光性
(6)目镜。在荧光显微镜中多用低倍目镜,如5×和6.3×。过去多
用单筒目镜,因为其亮度比双筒目镜高1倍以上,但目前研究型荧光显
微镜多用双筒目镜,方便观察。
(7)落射光装置。落射荧光显微镜还具有落射光装置,落射光装置
可使荧光图像的亮度随着放大倍数增大而提高,在放大倍数高时比透射
光源强,更适用于不透明及半透明标本,如厚片、滤膜、菌落、组织培
养标本等的直接观察。近年研制的新型荧光显微镜多采用落射