货号：70022 mRNA纯化试剂盒 (12)

英文名称：Oligotex mRNA Mini Kit (12)

中文名称：mRNA纯化试剂盒 (12)

品     牌：Qiagen

货     号：70022

从总RNA中纯化mRNA以及回收体外转录产物

只需30分钟即可获得高产量纯MRNA

无需使用Oligo-DT纤维素或乙醇沉淀

灵活性强，适合不同起始量的RNA样品

Oligotex mRNA Kits可从总RNA中纯化mRNA，回收poly A

+

体外转录子。每个Oligotex Kit包括用于结合poly A

+ 

mRNA的Oligotex树脂和用于洗涤、洗脱结合的mRNA的离心柱。Oligotex Direct mRNA Kits可从细胞和组织中纯化mRNA。

70022 mRNA纯化试剂盒

特点

参数

应用

PCR, real-time PCR, microarray, transfection..

洗脱体积

20–100 µl

规格

Spin column

主要样本类型

Total RNA

处理

Manual (centrifugation)

纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白

Poly A+ mRNA

样本量

<250 µg

稳定

Yes

技术

Polystyrene-latex particles

每次运行或制备时间

33–50 minutes

产量

>90% recovery

性能

Oligotex mRNA kits适用于从少于0.25 mg到1 mg总RNA起始材料中分离mRNA（见表）。

使用Oligotex树脂纯化的Poly A

+

 mRNA适用于RT-PCR（参见

RT-PCR of beta-actin mRNA

），使用Oligotex树脂从总RNA中纯化的poly A

+

 mRNA已被用于Northern 印记、点印记或狭缝印记（参见

Isolation of mRNA from total RNA

）。

表. Oligotex mRNA kits的规格

每次实验起始材料量（总RNA）

每个Oligotex mRNA Mini Kit

*

zui多制备次数

每个Oligotex mRNA Midi Kit

*

zui多制备次数

≤0.25 mg

12 (13)

†

12 (28)

†

0.25—0.5 mg

6

12 (14)

†

0.5—0.75 mg

4

12 (14)

†

0.75—1 mg

3

12

* 使用离心管操作流程。批量实验流程可选。 

†

 购买额外的离心柱后，每个试剂盒的zui多制备次数。可能需要额外的1.5 ml微离心管。

原理

Oligotex mRNA Kits含有离心柱和各种必需的试剂，用于从总RNA样品中纯化poly A

+

 mRNA或回收体外转录产物。Oligotex树脂由大小均一（直径1.1 µm ）的聚苯乙烯-橡胶颗粒组成，为*的球状（参见

Oligotex particles and oligo-dT cellulose

），含有与表面共价结合的dC

10

T

30

寡核苷酸。Oligotex颗粒的大小、成分和表面结构经优化，均匀分散并需要zui少的离心时间。颗粒形成稳定的悬浮液，为快速和高效结合多聚腺苷酸提供较大的表面积。

高效率、高精确度的杂交确保通过快速、高效的杂交获得高纯度的poly A

+

 mRNA。mRNA回收率通常都高于90%。Oligotex纯化过程将poly A

+

 RNA流失降至zui低，避免RNase降解风险，手动操作时间zui少化。这些都使得该产品是同步处理多个样品的理想选择。Poly A

+

 mRNA适用于各种标准应用，也适用于敏感应用，如表达分析、差异显示、cDNA文库构建、显微注射和SAGE技术。Oligotex Suspension也可单独购买。

操作流程

经优化的Oligotex纯化流程方便简单（参见

Oligotex mRNA procedure

），将总RNA与Oligotex树脂共同孵育，简单离心收集Oligotex:mRNA复合物。试剂盒中提供的离心柱提供zui方便的操作，同时为某些应用提供可选的批量操作流程。洗涤之后，用小体积量的Tris缓冲夜或水洗脱mRNA。无需乙醇沉淀。

应用

使用Oligotex树脂纯化的Poly A

+

 mRNA适用于多种下游应用，包括：

消减杂交

体外翻译