霉菌酵母菌测试片  1、原理及适用范围

     霉菌和酵母菌广泛存在于空气、水和土壤中，绝大部分对人体无害，但有些霉菌对人体有害，比如说黄曲霉，它分泌的黄曲霉毒素是一种强致癌物。霉菌还可引起食物霉变，会刺激人体消化道、胃部等，严重的还可损伤肝脏，造成食物中毒。霉菌酵母菌测试片（FilmplateTM Enumeration of moulds and yeasts BM207）由营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂等组成。与传统方法相比，省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以开始进行抽样检测，而且操作简便，通过酶显色剂的放大作用，使菌落提前清晰地显现出来，培养时间由一周缩短为72h。本品可用于各类食品（如糕点、饼干等）中霉菌和酵母菌的计数，非常适合于食品卫生检验部门和食品生产企业使用。执行标准：食品安全国家标准 食品微生物学检验霉菌和酵母计数（GB/T 4789.2010）。

    2、操作方法

     2.1、样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL无菌水的取样罐或均质杯内，振摇30min，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入含有9mL无菌水的试管内，反复吸吹50次成为1:100的样品匀液，以此类推，做出1:1000等稀释度的样品匀液，每次换一支吸管。

     2.2、接种：一般食品选2～3个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置10s左右使培养基凝固。每个稀释度接种两片，同时用无菌水做空白阴性对照。

     2.3、培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为28℃±1℃，培养48～72h。

    3、结果判读

     霉菌和酵母菌在测试片上生长后会显示蓝色斑点，霉菌菌落显示的斑点略大呈放射状，酵母菌落则较小而圆滑，许多霉菌在培养后期会呈现其本身*的颜色。选择菌落数在10CFU～150CFU的纸片进行计数，计算两个测试片的平均值乘以稀释倍数后即为每毫升（克）样品中霉菌和酵母菌的数目。

    4、计数原则及报告方式

     4.1计数

     4.1.1 若所有稀释度的平均菌落数均大于150CFU，则对稀释度zui高的测试片进行计数，按平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见例1）。

     4.1.2 若所有稀释度的平均菌落数均小于10CFU，则应按稀释度zui低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见例2）。

     4.1.3 若所有的稀释度（包括液体样品原液）均无菌落生长，则以小于1乘以zui低稀释倍数报告之（见例3）。

     4.2报告

     4.2.1 菌落数在100以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。

     4.2.2 菌落数大于或等于100时，前三位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前两位数字，后面用0代替位数，也可用10的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。

     4.2.3 称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/mL为单位报告。

    例次 稀释度及菌落数 选定计数

    稀释度 报告方式

    （CFU/g或CFU/mL）

    10-1 10-2 10-3

    1

    2

    3 多不可计

    8

    0 352

    5

    0 169

    1

    0 10-3

    10-1

    ＜1×10 3.0×10 5

    8.0×10

    ＜1×10

    5、附加说明

     由于霉菌常以孢子的形式在空气中到处传播，而多种样品是要求霉菌酵母菌不得检出，因此检测霉菌时需特别小心操作，取样用品、稀释用水和吸管吸头等都需仔细消毒，接种时尽量避免空气流动，动作要干净利落，每次用无菌水接两片空白对照，以免出现假阳性结果。

    6、保存条件

     本产品需存放在4℃～10℃冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水，在拆封前将整包回温至室温。 

：李菲     :