北京中诺泰安科技有限公司

程：      

菌落总数测试片

1

适用范围：可

用于各类食品及原料中菌落总数的测定。

也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。

2

方法原理

：

将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑（

TTC

）显色剂等加载在试纸片，经加样、培养后，

细菌

菌落在测试片上显现出红色菌斑，通过计数报告结果。

3

操作方法

3.1

样品处理：

无菌称取样品

25g

（或

25mL

）放入含有

225mL

无菌生理盐水的采样瓶或均质杯内，经充分振摇（均质）做成

1:10

的稀释液。用

1mL

灭菌吸管吸取

1:10

稀释液

1mL

，注入含有

9mL

灭菌生理盐水的试管内，用

1mL

灭菌吸管反复吸吹制成

1:100

的稀释液。以此类推，做出

1:1000

等稀释度的稀释液，每个稀释度更换一支灭菌吸管。

3.2

接种：

一般食品选

2

～

3

个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如食用纯水和矿泉水等）可直接用原液检测。将测试片放在水平台面上，揭开上面的透明薄膜，用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液

1mL

，均匀加到中央的纸片上，轻轻将上盖膜放下，

静置

5

min

使培养基凝固，zui后用手轻轻地压一下。每个稀释度接种两片。

3.3

培

养：

将测试片叠在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过

12

片。培养温度为

36

℃

±

1

℃

，培养

15

～

24h

。

4

结果判断与计数：

4.1

细菌在纸片上生长后会显示红色斑点，选择菌落数适中（

10

个～

100

个）的纸片进行计数，乘以稀释倍数后即为每克（或毫升）样品中所含的细菌菌落总数。菌落数在

100

以内时，按实有数报告。大于

100

时，用二位有效数字，二位有效数字后面的数字，以四舍五入方法计算，并以

10

的指数来表示。

4.2

计数原则与报告方式

4.2.1

通常选择菌落在

10

个～

100

个之间的纸片进行计数，乘以稀释倍数报告之（见下表中例

次

1

）。国家标准菌落总数报告方式术语为

cfu/g

或

mL

，

cfu

的含义为菌落形成单位。

4.2.2

若有两个稀释度的菌落数在

10

个～

100

个之内，两者的比值小于

2

，则取其平均数，若大于

2

，则采用稀释度小者报告（见下表

中

例

次

2

和例

次

3

）。

4.2.3

若三个稀释度的菌落数都有在

10

个～

100

个之内时，应选择二个低数值的平均数（见下表中例次

4

）。

4.2.4

若三个稀释度的菌落数均小于

10

个或大于

100

个时，应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数；或采用均小于数量标准的zui小值，或采用均大于数量标准的zui大值（见下表中例次

5

和例次

6

）。

例次

稀释度

两稀释

度之比

选定计数

稀释度

报告方式

（个

/g

或

个

/mL

）

10

-1

10

-2

10

-3

1

2

3

4

5

6

158

208

265

98

8

295

76

68

82

50

5

174

5

12

50

15

1

106

—

1.8

6.1

—

—

—

10

-2

10

-2

、

10

-3

10

-2

10

-1

、

10

-2

10

-1

10

-3

7.6

×

10

3

9.4

×

10

3

8.2

×

10

3

3.0

×

10

3

8.0

×

10

1.1

×

10

5

5

表面取样方法：

加

1mL

灭菌生理盐水在测试片上，静置至少

1h

使培养基凝固；提起上层膜，使中央滤纸部分贴到待测物表面，用手在外侧轻压；然后将上盖膜合上，置培养箱内培养。

6

注意事项：

使用过的纸片上带有活菌，需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。

菌落数少时的情况          

菌落数多时的情况